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SEC（Size Exclusion Chromatography）是一种液相色谱分离技术，也称为凝胶过滤色谱。SEC能够将多聚体物质根据大小和形状进行分离，所以广泛应用于生化分析和工业制药中。SEC重要的组成部分就是色谱柱，因此我们需要了解SEC色谱柱设计原理。
SEC色谱柱的主要部件是填料，填料的选择要根据样品的特点来定。通常采用的即是硅胶凝胶或者琼脂糖凝胶，这些凝胶是一类具有交联结构的高分子材料，可提供一定的孔隙用于分离、定量分析及纯化目标大分子化合物。使用小分子化合物做指示剂，看其在渗透性强的分子筛孔道和颗粒之间晃动情况，再与相应的临界分子量对照确定待测物质的分子大小。故SEC的关键在于色谱柱的分离效率和分辨率。
首先，填料粒径在设计时很重要。柱子内储存不同尺寸的微粒需要合适的粒径大小区分开，因此具有不同孔径长度的填料列装方式在SEC色谱柱中被广泛使用。这样柱内就可以形成一个分子筛效应，使得纯度更高。
其次，则是填料的类型。如前述，硅胶凝胶和琼脂糖凝胶是两种常用的填料，硅胶适合聚酸、聚乙烯醇、聚硫化橡胶等水溶性标样，而琼脂糖凝胶则针对肽类、核酸及寡聚糖等生物大分子，也可以根据需要调节pH值以重定分离机理和选择适当的溶剂来进行操作。
然后则是特殊的处理技巧。在一些情况下，可能会出现液相分离的情况导致低分子量多聚体大于高分子量多聚体地往下移动，从而影响测试结果。因此，在分析部分材料时，需要注意样本浓度和流速控制，加入一些共轭剂来限制带电粒子的积聚。
总之，SEC色谱柱设计需要考虑填料选型、填料粒径、沉降速率、线速率、柱子规格、流速等一系列参数，才能提供符合实验标准的分离试验。在应用中，需要根据样品类型和待检测成分不同来选择合适的色谱柱。
SEC色谱柱
https://www.chem17.com/st168422/erlist_2218714.html
https://www.chem17.com/st168422/product_35650194.html
SEC色谱柱的分离试验